如何用半自动定氮仪测定蛋白质含量

　　凯氏定氮法是测定食品中蛋白质含量的经典方法,测定结果稳定,准确。其中半自动定氮仪、蛋白质测定仪都是利用凯氏定氮仪设计的，但是全自动蛋白质测定仪价格昂贵,目前尚难普及。而相应的半自动定氮仪，却得到了相关人士的认可。因为相较于全自动蛋白质测定仪，它的性价比更高，而且其测定结果与标准法测定无显著差异。定氮仪作为蛋白质含量测定的首推仪器，具有不可撼动的地位。

　　用半自动定氮仪测定蛋白质含量，其步骤如下：

　　1.样品消解：准确称取0·5~2·0 g混匀固体样品或吸取5·0~10·0 ml液体样品于干净的消化管内,加0·5 ~1·0 g硒粉或10 g硫酸钾+1 g硫酸铜, 10ml硫酸,摇匀,加10 ml过氧化氢,混匀,将消化管放入消化器,放上装好密封圈的排污管,打开抽气三通进水,使抽气三通处于吸汽状态。接通电源,进行消化,如遇难消化的奶粉等样品,可于消化过程中适当增加过氧化氢的加入量,至消化液呈透明蓝绿色液体,关闭电源,冷却,定容至100 ml。此过程约需1~2 h。2.测定：打开电源,按仪器说明书调试仪器进入待机状态(约0·5 min)。把装有50 ml硼酸溶液及2~3滴指示液的三角瓶放到接收托盘上,接收管插入液面,再将内装适量消化样品的消化管放到蒸馏器上,加20 ml纯水及消化时硫酸5倍量的氢氧化钠液,打开蒸汽开关进行蒸馏。当流出液至150 ml左右时下移接收瓶,使接收管脱离液面,用纯水冲洗接收管,继续蒸馏0·5 min,结束。取下消化管,关掉蒸汽开关,仪器还原到待机状态。馏出液用0·0500 mol/L的盐酸标准溶液滴定至淡紫色为终点,计算蛋白质含量。同时做试剂空白实验。

　　与粗蛋白测定仪相比，半自动定氮仪只是较后者少了消化炉，而其测定结果能够满足实验室的需求。因此，半自动定氮仪在很多地方都得到了认可。