凯氏定氮仪对蜂产品蛋白质含量的测定改进
来源： http://www.grain17.com/ 类别：实用技术 更新时间：2014-03-24 阅读次
蜂产品的营养价值十分丰富，是人们日常生活中常见的绿色保健品。蜂产品的蛋白质含量是十分可观的，其测定方法主要是采用凯氏定氮仪进行测定的。但是这种方法操作起来十分繁琐，消化的时间也比较长，需要蒸馏滴定，费时费力。但是通过改进消化条件,即采用过氧化氢-浓硫酸混合液为消化液,消化过程中滴加硝酸-高氯酸混合酸,缩短了消化时间。样品中的蛋白质与硫酸和催化剂一同加热分解,生成的氨与硫酸反应生成硫酸铵,硫酸铵在碱性溶液中与次氯酸盐生成一氯胺,在亚硝基铁氰化钠催化作用下与水杨酸生成蓝色化合物,可在655nm波长下比色定量。
称取样品2.0g于250mL定氮瓶中,加入硫酸铜0.5g,硫酸钾5.0g,硫酸-过氧化氢(2+1)混合液20mL;摇匀后于瓶口放一小漏斗,置于有石棉网的可调电炉上,小火加热,至泡沫停止后,加大火力,缓慢分次滴加硝酸-高氯酸(4+1)混合酸2~3mL,样液变蓝透明后,继续加热30min,取下放冷后,加水20mL,冷却后分次洗入500mL(蜂蜜消化液洗入250mL)容量瓶中。移取样品消化液5.0mL于另一个100mL容量瓶中,加水至刻度备用,同时作试剂空白。
通过改进凯氏定氮仪对蜂产品蛋白质消化的条件,有效地缩短了反应时间,由原来的3.5h缩至2h左右。由于水杨酸光度法样品消化液不需要蒸馏,直接用于测定,更适宜于批量样品的测定,水杨酸光度法与国标法比较无显著性差异,所以水杨酸光度法因其操作简便、准确、迅速,可用于蜂产品中蛋白质的测定。凯氏定氮仪对蜂产品蛋白质含量的检测结果十分精准，可以采用。
称取样品2.0g于250mL定氮瓶中,加入硫酸铜0.5g,硫酸钾5.0g,硫酸-过氧化氢(2+1)混合液20mL;摇匀后于瓶口放一小漏斗,置于有石棉网的可调电炉上,小火加热,至泡沫停止后,加大火力,缓慢分次滴加硝酸-高氯酸(4+1)混合酸2~3mL,样液变蓝透明后,继续加热30min,取下放冷后,加水20mL,冷却后分次洗入500mL(蜂蜜消化液洗入250mL)容量瓶中。移取样品消化液5.0mL于另一个100mL容量瓶中,加水至刻度备用,同时作试剂空白。
通过改进凯氏定氮仪对蜂产品蛋白质消化的条件,有效地缩短了反应时间,由原来的3.5h缩至2h左右。由于水杨酸光度法样品消化液不需要蒸馏,直接用于测定,更适宜于批量样品的测定,水杨酸光度法与国标法比较无显著性差异,所以水杨酸光度法因其操作简便、准确、迅速,可用于蜂产品中蛋白质的测定。凯氏定氮仪对蜂产品蛋白质含量的检测结果十分精准，可以采用。
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